大鼠白介素2（R IL-2）elisa試劑盒
1976年Morgan等發(fā)現(xiàn)小鼠脾細(xì)胞培養(yǎng)上清中含有一種刺激胸腺細(xì)胞生長(zhǎng)的因子，由于這種因子能促進(jìn)和維持T細(xì)胞長(zhǎng)期培養(yǎng), 稱為T細(xì)胞生長(zhǎng)因子 (T cell growth factor, TCGF),1979年統(tǒng)一命名為白細(xì)胞介素2(interleukin 2,IL-2)。
1. IL-2的產(chǎn)生 IL-2主要由T細(xì)胞或T細(xì)胞系產(chǎn)生。
(1)CD4陽(yáng)性或CD8陽(yáng)性T細(xì)胞:有絲分裂原刺激CD4陽(yáng)性或CD8陽(yáng)性T細(xì)胞亞群均可產(chǎn)生IL-2同種異體抗原主要刺激 CD4陽(yáng)性T細(xì)胞分泌IL-2。PBMC、脾臟、**結(jié)和扁桃腺中的T細(xì)胞受到刺激后都能產(chǎn)生IL-2。在小鼠Th細(xì)胞中，只有Th1亞群可產(chǎn)生IL-2。
(2)T細(xì)胞腫瘤細(xì)胞系或白血病細(xì)胞系: 人和動(dòng)物某些T細(xì)胞白血病細(xì)胞系或腫瘤細(xì)胞在有絲分裂原、鈣離子載體(如 A23187) 或PMA刺激下可產(chǎn)生高水平的IL-2。如長(zhǎng)臂猿T細(xì)胞系MLA144可自發(fā)產(chǎn)生IL-2,小鼠胸腺瘤細(xì)胞系EL-4和人Jurkat細(xì)胞靜止?fàn)顟B(tài)不合成和分泌IL-2,刺激后可分泌高水平的IL-2。
(3)T**細(xì)胞雜交瘤: T**細(xì)胞雜交瘤123,FS6-14.13, HT-24A等在ConA刺激下產(chǎn)生IL-2。
(4)應(yīng)用基因工程技術(shù)制備: 1983年Taniguchi等從ConA刺激的Jurkat白血病T細(xì)胞中克隆成功IL-2cDNA，并在大腸桿菌中得到高水平的表達(dá)。目前應(yīng)用基因工程技術(shù)所制備和純化的IL-2已用于臨床**某些腫瘤和其它**。
2. IL-2的分子結(jié)構(gòu)和基因 人IL-2含有133氨基酸殘基，分子量為15.5kDa。天然IL-2在N端含有糖基，但糖基對(duì)IL-2的生物學(xué)活性無(wú)明顯影響，等電點(diǎn)在6.6～8.2。 IL-2分子含有3個(gè)半胱氨酸，分別位于第58、105和125位氨基酸，其中58位與105位半胱氨酸之間所形成的鏈內(nèi)二硫鍵對(duì)于保持IL-2生物學(xué)活性起重要作用。在IL-2基因產(chǎn)物的提純和復(fù)性過(guò)程中，如二硫鍵配錯(cuò)或分子間形成二硫鍵都會(huì)降低IL-2的活性?，F(xiàn)已有應(yīng)用點(diǎn)突變， 將第125號(hào)位半胱氨酸突變?yōu)榱涟彼峄蚪z氨基，使只能形成一種二硫鍵，保證了在IL-2復(fù)性過(guò)程的活性。還有報(bào)道用蛋白工程技術(shù)生產(chǎn)新型rIL-2，將IL-2分子第125位半胱氨酸改為丙氨酸, 改構(gòu)后IL-2比活性比天然IL-2明顯增加。人IL-2基因定位于第4號(hào)染色體，長(zhǎng)約5kb，由４個(gè)外顯子和3個(gè)內(nèi)含子組成。人和小鼠IL-2基因DNA序列有63％同源性。
本試劑盒采用雙抗體夾心法。抗人IL-2單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的IL-2會(huì)與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗人IL-2抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素，生物素與親和素特異性結(jié)合；抗人IL-2抗體與結(jié)合在單抗上的人IL-2結(jié)合而形成**復(fù)合物，若反應(yīng)孔中有IL-2，會(huì)有顯色反應(yīng)。在450 nm處測(cè)OD值，IL-2濃度與OD450值之間呈正比，可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IL-2濃度。
本試劑盒用于體外定量檢測(cè)人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液或組織勻漿上清液中IL-2濃度，供科研使用。
試劑盒內(nèi)容物：
|
產(chǎn)品名稱
|
規(guī)格
|
|
1a標(biāo)準(zhǔn)品
|
2支（凍干）
|
|
1b標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
1瓶
|
|
2a濃縮生物素化抗體
|
1支
|
|
2b生物素化抗體稀釋液
|
1瓶
|
|
3a濃縮酶結(jié)合物
|
1支
|
|
3b酶結(jié)合物稀釋液
|
1瓶
|
|
4濃縮洗滌液20×
|
1瓶
|
|
顯色液
|
1瓶
|
|
終止液
|
1瓶
|
|
抗體包被板條
|
8*12
|
|
封板膠紙
|
3張
|
|
說(shuō)明書
|
1份
|
保存條件：
4℃保存，6個(gè)月有效。
注意事項(xiàng)：
1. 短期內(nèi)使用可將試劑盒保存在2-8℃，如長(zhǎng)時(shí)間請(qǐng)于-20℃保存。
2. 濃縮生物素化抗體（2a），濃縮酶結(jié)合物（3a）裝量極少，運(yùn)輸中可能會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請(qǐng)用手甩幾下或離心處理，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶，這屬于正?，F(xiàn)象，加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
4. 不建議重復(fù)使用標(biāo)準(zhǔn)品。
5. 充分混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤其重要，*好使用微量振蕩器，也可在反應(yīng)過(guò)程中手工混勻。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測(cè)時(shí)建議作雙復(fù)孔或三復(fù)孔。
7. 為了您的**和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
上海歐韋達(dá)儀器科技有限公司提供上等的分子生物學(xué)試劑和試劑盒、培養(yǎng)基和培養(yǎng)耗材、細(xì)胞因子和細(xì)胞分離液、抗體和elisa試劑盒及常用生物試劑等，大量現(xiàn)貨火爆促銷中，歡迎撥打021-61805606洽談選購(gòu)！