膜蛋白提取試劑盒
產品簡介：
哺乳動物跨膜蛋白承擔各種生物功能，在**的發(fā)生、發(fā)展過程中扮演重要角色。膜蛋白樣品的制備需要充分考慮到與下游的膠分析及質譜分析等應用配套，因此膜蛋白樣本制備成為一個難以逾越的挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)制備膜蛋白樣品的方法是使用去污劑和表面活性劑增溶。去污劑處理會使膜蛋白喪失其天然結構，因而妨礙了膜蛋白的功能研究。
膜蛋白提取試劑盒是一種基于化學而非去污劑方法的高產膜蛋白提取試劑盒。本試劑盒提供全套試劑，適用于從細胞和動物組織提取膜蛋白。提取過程簡單方便，可在1小時內完成。提取的膜蛋白不僅純度高，保持天然活性，而且絕少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、轉錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實驗、**共沉淀、酶活性測定等蛋白研究。
產品組成：
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產品組成
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310005
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310006
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規(guī)格
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50 assays
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100 assays
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試劑 A
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10ml
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20ml
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試劑 B
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10ml
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20ml
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試劑 C
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10ml
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20ml
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蛋白酶抑制劑混合物
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250ul
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500ul
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使用方法：
A． 細胞蛋白提取
1. 取5-10×106個細胞，在4℃，500×g條件下離心2-3分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集細胞。
2. 用冷PBS洗滌細胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
3. 每20ul細胞壓積中加入200μl冷的試劑 A，2ul蛋白酶抑制劑混合物，高速渦旋振蕩15秒，置冰上10分鐘。
4. 再次高速渦旋振蕩5秒，然后在4℃，16000×g條件下離心5分鐘。
5. 快速將上清吸入另一預冷的干凈離心管，12000轉4℃離心10分鐘取沉淀溶于試劑B中。
6. 試劑B12000轉4℃離心10分鐘，取沉淀溶于試劑C中。。
7. 即可得到膜蛋白。
B． 組織蛋白提取
1. 取適量組織樣本剪碎，加冷PBS，用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體（或用液氮研磨），冰上靜置5分鐘，小心將上清吸入另一預冷的干凈離心管。
2. 在4℃，500×g條件下離心2-3分鐘，棄上清。
3. 按照細胞蛋白的提取方法的第3步驟往下操作即可。
上述蛋白提取物請分裝后于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/span>
注意事項：
1. 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。
2. 整個過程須保持樣品處于低溫狀態(tài)。
儲存條件：
-20℃保存。