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產(chǎn)品名稱: ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒
產(chǎn)品型號: Obb-320002
產(chǎn)品展商: 國產(chǎn)
產(chǎn)品文檔: 無相關(guān)文檔
簡單介紹
ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒”**印跡*重要也是*后一步就是酶與底物反應(yīng)進(jìn)行檢測,本試劑盒以化學(xué)熒光發(fā)光方法檢測蛋白質(zhì)或核酸類生物大分子
ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒
的詳細(xì)介紹
ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒
產(chǎn)品簡介:
**印跡*重要也是*后一步就是酶與底物反應(yīng)進(jìn)行檢測,本試劑盒以化學(xué)熒光發(fā)光方法檢測蛋白質(zhì)或核酸類生物大分子。其原理是,蛋白質(zhì)或核酸在電泳后轉(zhuǎn)移到印跡膜上,以一抗及辣根過氧化物酶HRP標(biāo)記的二抗結(jié)合膜上的目的蛋白,或以HRP標(biāo)記的探針直接或間接結(jié)合膜上的核酸。洗膜后用本產(chǎn)品配制的ECL工作液,在可見光下室溫孵育膜數(shù)分鐘,將印跡膜用保鮮膜包被粘貼固定于X光片曝光暗盒。然后轉(zhuǎn)入暗室將X光膠片壓在膜上曝光數(shù)秒到數(shù)分鐘至數(shù)小時。顯影定影后蛋白質(zhì)或核酸條帶可清晰顯示在X光膠片上。也可不進(jìn)行X光膠片曝光直接對印跡膜進(jìn)行熒光CCD掃描。
產(chǎn)品組成:
貨號
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320001
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320002
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試劑 I
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5ml(20X)
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10ml(20X)
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試劑 II
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5ml(20X)
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10ml(20X)
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使用方法:
1. 使用合適的方法進(jìn)行 Western,直至用PBST洗滌二抗。
2. 新鮮配制ECL工作液:試劑I和試劑II按1:1混合后, 用雙蒸水10倍稀釋,混合后即為ECL工作液。須立即使用!
3. 印跡膜蛋白面朝上,用ECL工作液均勻滴加至印跡膜室溫孵育1-2分鐘。ECL工作液使用量大約為0.125ml/cm2膜或根據(jù)個人實驗習(xí)慣使用。
4. 用平頭鑷夾住印跡膜,垂直置于吸水紙以吸去多余工作液。
5. 快速將印跡膜置于二層保鮮膜之間,盡量趕盡氣泡。
6. 將印跡膜蛋白面朝上,放于X光膠片暗盒內(nèi)。
7. 在暗室內(nèi)放入X光片,曝光,顯影。
注意事項:
1. ECL工作液配制過程中吸取試劑I和試劑II時務(wù)必跟換吸頭,工作液新鮮配制后立即使用,放置過久會影響靈敏度。
2. 根據(jù)蛋白豐度不同曝光時間可能是數(shù)秒至數(shù)小時。
3. 曝光時間過長會使背景加深,曝光不足會導(dǎo)致條帶模糊。
4. 如果曝光后條帶不佳,可用洗膜緩沖液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用ECL發(fā)光和曝光。
5. 應(yīng)使用高質(zhì)量保鮮膜。
儲存條件:
2-8℃保存